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Bienvenue sur la plateforme de transgénèse de l’UQAM. Mise sur pied en collaboration avec le Laboratoire de génétique moléculaire du développement, cette plateforme est une composante du Service des animaleries permettant la production de souris transgéniques par injection d’ADN dans un des pro-noyaux d’ovocytes fraîchement fécondés (embryons 1-cellule). Dépendamment des besoins visées, cette méthode permet de faire des modifications génomiques aléatoires aussi bien que ciblées (système CRISPR). Une fois vos constructions d’ADN finalisées, nos experts en microinjection vous guideront dans la préparation de l’ADN jusqu’à la réception des animaux transgéniques.

Coût

Veuillez nous contacter pour connaître les coûts.

Préparation de l'ADN

Pour une microinjection conventionnelle, vous devez fournir ~100µg de votre construction plasmidique préalablement digérée avec une ou des enzymes de restriction permettant de retirer le maximum de séquences plasmidiques non-nécessaires. Vous devez aussi fournir une photo d’un gel d’agarose sur lequel vous aurez fait migrer un petit aliquot de votre digestion. Sur cette photo, il est important de nous indiquer le fragment devant être microinjecté.

Pour une microinjection de type CRISPR, prière de nous contacter au préalable.

Soumission de l'ADN

Pour soumettre votre ADN à microinjecter, vous devez tout d’abord nous fournir un numéro de bon de commande (P.O.) valide et compléter le formulaire de soumission. Vous serez ensuite contacté afin de nous faire parvenir votre ADN.

Engagement du service de microinjection

Nous microinjectons 150-200 embryons par séance. Les embryons survivants sont ensuite transférés dans des femelles pseudogestantes. De routine de 10 à 30 rejetons naîtront trois semaines plus tard et, sur ce nombre, de 2 à 3 devraient portés le ou les transgènes souhaités. La plateforme de transgénèse de l’UQAM garantit au minimum 2 souris fondatrices transgéniques (indépendamment de l’expression du transgène).

Transmission et réception des femelles gestantes ou des tissus en vue du génotypage

Lorsque les rejetons atteindront 3 semaines d’âge, notre équipe procédera à un prélèvement de tissu de chaque souris (queue ou oreille selon votre choix). Il sera alors de votre responsabilité de procéder au génotypage et de nous communiquer vos résultats dans un délai de 3 semaines. Les animaux sélectionnés seront ensuite transférés à l’endroit déterminé lors de l’entente.
Si vous souhaitez recevoir les femelles gestantes vous devez en faire la demande à notre équipe pour en déterminer les conditions.

Contact

Plateforme de transgénèse
transgene.uqam@gmail.com
514 987-3000 poste 8584
Pavillon Chimie-Biochimie UQAM
Local CB-R339

Guillaume Bernas
M. Sc. Science cellulaire et moléculaire du vivant.

Normand Lapierre
Tech. en gestion des soins animaliers

 

 

Entente de services

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